（一）原理及適用範圍

將乳糖膽鹽選擇性培養基和TTC顯色劑加載在紙片上，經培養（yǎng）後（hòu）能夠在紙片上生長並發酵乳糖（táng）產酸（suān）的即為大腸（cháng）菌群陽性，記錄每個稀釋度（dù）大腸菌群陽性紙片數，根據大腸菌群MPN表查出相（xiàng）應的大腸菌群數。食品大腸（cháng）菌（jun1）群檢驗紙片法與國（guó）標法中的九管法相對（duì）應，將原來（lái）幾步的試驗簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內，省去了製備培養基、消和培養（yǎng）器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。執行標準：食品安全國家標準食品微生物檢（jiǎn）驗大腸菌群計數MPN計數法（GB 4789.3）。

適用（yòng）於（yú）各類食品、飲料等樣品中大腸菌群的快（kuài）速測定。

（二）操作方（fāng）法

樣品處理：

按無菌（jun1）操作稱（chēng）取樣品25g（或25mL）放入含有225mL滅（miè）菌磷酸緩衝液（yè）稀釋液（或生理鹽水）的取樣瓶或均質杯中，經充（chōng）分振搖做（zuò）成1：10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應在6.5～7.5之間，必要時用1mol/L氫氧化鈉或（huò）1mol/L鹽酸調節。用1mL滅（miè）菌吸管吸取1：10樣品勻液，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖試管製成1：100的樣品勻液。根據（jù）對樣品（pǐn）汙染狀況的（de）估計，按上述操作，一次製（zhì）成10倍遞增係列稀釋樣品（pǐn）勻液（yè）。每遞增稀（xī）釋1次，換一支1mL無菌吸管或吸頭。從製備樣品勻（yún）液至樣品接種完畢，全過程（chéng）不得（dé）超過15min。

接種：

選取兩個稀釋度進行接種，普通食品一（yī）般采用1：10和1：100這兩個稀釋度，飲料采用原液和1：10兩（liǎng）個稀釋度。本品每份由三（sān）片大紙片（接（jiē）10mL，袋中二片疊放算作一大片），六片小紙片（接1mL）組成。

用（yòng）滅菌吸管吸取10mL 1：10樣品勻液加到（dào）含（hán）有大紙片的塑料袋中（相當於接（jiē）樣（yàng）品1g），吸透後平放，做三個重複。再用1mL滅菌（jun1）吸管吸取1mL同一（yī）稀釋度（dù）的樣（yàng）品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當於接樣品0.1g），做三個（gè）重複。再另取一支1mL滅菌吸（xī）管吸取1mL 1：100樣品勻（yún）液加（jiā）到含有小紙片的塑料袋中（相（xiàng）當於接樣品0.01g），做三個重複。

培養：

將接種好的（de）紙片（可（kě）疊放）放入36℃±1℃培養箱中培養15～24h。

（三）大腸菌群非常可能數（MPN）的報告。

若紙片變黃或在黃（huáng）色背景上呈現（xiàn）紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景（jǐng）上呈（chéng）現紅色斑點，但周（zhōu）圍沒有黃色均為大腸菌群陰性（xìng）紙片。

記錄每個稀釋度大腸（cháng）菌群陽性紙片數，根據《食品飲料大腸（cháng）菌群MPN表》查出相（xiàng）應的大腸菌群數。

如接種的第一個梯度為原（yuán）液，應將表上查出的結果除以（yǐ）10。

（四）注意事項

新的國家標（biāo）準所用的單（dān）位改為每克（或毫升（shēng））檢樣中大腸菌群非常可能數，標準的接種量為0.333g（mL），MPN表也是由（yóu）此而設計。而使（shǐ）用本（běn）品的（de）標準接種量為3.33g（mL），大紙片接種10mL 1：10樣品勻液相當於1g樣品（pǐn），因而（ér）表內數字應相應降低10倍。飲料（liào）樣品的接種量為33.3mL，大紙片接種10mL樣品原液，表內數字應（yīng）降低100倍。

（五）保存條件

本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打開後,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱（xiāng）中，一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水，非常好在拆封前將整包回溫至室溫。